基质胶应用(5)-使用技巧全揭秘-技术前沿-资讯-生物在线

基质胶应用(5)-使用技巧全揭秘

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2025-07-28T00:00 (访问量:3490)

01

前 言

基质胶是3D细胞培养、类器官、成瘤、侵袭、血管生成等实验的“万能支架”。然而,从解冻到铺板,从浓度选择到结果判读,稍不留神就可能“翻车”。翌圣生物结合上万次实验反馈,整理出这份“避坑指南”,助你一次上手,稳拿高分数据。

02

到货 & 储存

问题

翌圣建议

收到货后如何保存?

将本产品置于-20℃环境存放;若短暂放置,4 ℃不超过7天。

能否反复冻融?

不建议反复冻融;首次融化后立即分装(200 µL/管),-20 ℃保存。

如何进行融化?

冷冻状态的基质胶可以在操作前一天埋藏于碎冰中,再转移入4 ℃冰箱,次日即可使用。适当延长4℃融化时间可以有效减少基质胶中的气泡。

03

颜色/浓度怎么选?

类型

特点

适用场景

含酚红

pH指示

常规实验都可以使用含酚红产品,由于酚红存在时,在温度、pH不同的情况下液体会出现颜色的差异,颜色可以在明黄色至暗红色之间变化。

无酚红

无颜色干扰

涉及颜色检测的实验,推荐使用不含酚红的基质胶,如对子宫内膜细胞培养必须使用不含酚红的基质胶。此外,酚红是一种潜在的内分泌干扰物,有可能会干扰实验动物体内激素的自然产生和代谢能力。

标准浓度

蛋白浓度:8 - 12 mg/mL

Transwell实验、皮下成瘤实验

高浓度

蛋白浓度:18 - 22 mg/mL,凝胶3-5 min

皮下成瘤中较难成瘤的细胞系

低生长因子

标准浓度基质胶的基础上做了减生长因子处理

类器官培养、血管生成

04

实验细节

场景

高频问题

解决锦囊

皮下成瘤

荷瘤不成功可能的原因

取处于对数生长期的细胞,细胞达 80 - 90% 左右密度为宜

选择 4 - 6 周龄裸鼠,小于 4 周可能不耐受过早死亡,大于 6 周免疫力会增强,不易成瘤。

可能是小鼠免疫排斥,建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠

可以在接种后一周补种1次,可以很好的提高成功率

肿瘤长起来后又消失的原因

很可能是由于炎症反应,肿瘤细胞被小鼠自身吸收造成的。若后续肿瘤依旧未长出来,可考虑更换免疫缺陷程度更大的小鼠。

血管生成

成管实验中细胞 不能形成连续的网格

建议使用3-5代状态较好且融合度70%-80%的HUVEC细胞

细胞数量过少会使细胞无法形成连续的网络

4 - 18 h可见血管生成。建议每4个小时观察一次。

侵袭实验

细胞不转移

细胞侵袭转移能力比较弱

细胞的活性太差,活性不好的细胞做侵袭实验难度较大

用胰酶消化后,必须将含血清的培养基洗去

类器官实验

类器官传代的标准

不同类器官时间不同,通常7-14日、直径100-200um左右可以传代,有些发育慢的可能要数周才能发育到适合传代状态。

鉴定类器官的方法

最基础的通过显微镜和H&E染色观察类器官形态;进一步可以用免疫荧光检测该类器官是否表达相应的biomarker;

为什么观察到的形态却和文献不一致?

决定类器官形态的因素有很多,样本来源是否相同、选用的细胞因子品质是否有差异都有可能改变最终的类器官形态。

05

产品详情

产品名称

货号

规格

Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶

40183ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶

40184ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基质胶

40185ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶

40186ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基质胶

40187ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶

40188ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基质胶

40189ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基质胶

40190ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基质胶

40191ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus基质胶

40192ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

 

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